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黑曲霉产木聚糖酶的分离纯化与鉴定研究
其他题名Isolation,Purification,and Identification of Xylanase from Aspergillus niger SM24/a
高月淑1; 许敬亮2; 袁振宏2; 蒋剑春1; 何敏超2; 张宁1
2017-06
发表期刊微生物学杂志
ISSN1005-7021
卷号37期号:3页码:16-21
摘要木聚糖酶的分离纯化是对其进行酶学研究和分子改良研究的基础。利用实验室选育的黑曲霉菌株Aspergillus niger SM24/a进行木聚糖酶发酵,粗酶液经过(NH4)2SO4分级沉淀Bio-Gel P6除盐、UNO sphere Q阴离子交换和Enrich SEC70凝胶色谱层析四个步骤的分离纯化,成功获得了3种木聚糖酶蛋白定义为X-Ⅰ、X-Ⅱ和X-Ⅲ。随着纯化步骤的增加,各组分酶比活力得到显著提高,其数值分别为37.41、34.56和53.96 U/mg,纯化倍数分别为3.96、3.66和5.72。经质谱分析和蛋白氨基酸序列比对,初步认定X-Ⅰ属于糖基水解酶第十家族内切-β-1,4-木聚糖酶,X-Ⅱ和X-Ⅲ均属于糖基水解酶第十一家族木聚糖酶。
其他摘要Separation and purification of xylanase are the base of carrying out its enzymological study and molecular improvement. Xylanase fermentation was carried out using Aspergillus niger SM24/a bred in the lab. The crude enzyme solution was fractionally precipitated with( NH4)2SO4,desalinated by Bio-Gel P6,separated and purified with UNO sphere Q anion exchange and Enrich SEC70 gel chromatography,these four steps,and successfully obtained three kinds of xylanase,and named as X-Ⅰ,X-Ⅱ,and X-Ⅲ. As the increment of purification steps,the specific activity of each component was significantly improved,their numerical value respectively were 37. 41 U/mg,34. 56 U/mg and 53. 96 U/mg,and the purification folds were 3. 96,3. 66,and 5. 72 respectively. Through mass spectrometry and amino acid sequence comparison,it was initially confirmed that X-Ⅰ belonged to endo-β-1,4-xylanase of glycosyl hydrolase family 10,and both X-Ⅱ and X-Ⅱ belonged to xylanase of glycosyl hydrolase family 11.
关键词黑曲霉 木聚糖酶 分离纯化 鉴定
DOI10.3969/j.issn.1005-7021.2017.03.003
语种中文
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文献类型期刊论文
条目标识符http://ir.giec.ac.cn/handle/344007/16583
专题中国科学院广州能源研究所
通讯作者蒋剑春
作者单位1.中国林业科学研究院林产化学工业研究所,江苏南京210042;
2.中国科学研究院广州能源研究所,广东广州510640
推荐引用方式
GB/T 7714
高月淑,许敬亮,袁振宏,等. 黑曲霉产木聚糖酶的分离纯化与鉴定研究[J]. 微生物学杂志,2017,37(3):16-21.
APA 高月淑,许敬亮,袁振宏,蒋剑春,何敏超,&张宁.(2017).黑曲霉产木聚糖酶的分离纯化与鉴定研究.微生物学杂志,37(3),16-21.
MLA 高月淑,et al."黑曲霉产木聚糖酶的分离纯化与鉴定研究".微生物学杂志 37.3(2017):16-21.
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